Ulike kjemikalier og medier som brukes i et mikrobiologisk laboratorium

Ulike kjemikalier og medier brukt i et Microbiology Laboratory!

I laboratoriet dyrkes bakterier på næringsrike stoffer kalt "media". En rekke medier er også nødvendig for spesifikke bruksområder.

Komponentene i mediet veies i en gitt proporsjon, blandes i den nødvendige mengde vann og steriliseres i autoklav. Bakterier er inokulert i det og tillatt å vokse.

Å veie ingrediensene i media er en kjedelig jobb, og noen ingredienser kan bli savnet uvitende. For å overvinne denne vanskeligheten er nå-dag-ferdige medier i pulverform tilgjengelig.

Disse medier inneholder alle ingrediensene i de foreskrevne proporsjoner. Til en bestemt mengde av pulvermediet (som nevnt på pakningens etikett), tilsettes spesifisert mengde vann og steriliseres.

Kulturmedier er av følgende typer:

I. Kjemisk definert media:

Kjemisk definerte medier eller syntetiske medier er media, der alle bestemte kjemikalier (molekyler og atomer) og deres konsentrasjoner kan bestemmes. Kjemikaliene kan inkludere H20, NaCl, Na2S04, KCl og agar. Eksempler: uorganisk syntetisk buljong, glukosesaltbuljong.

II. Kompleks Media:

Komplekse medier er media, der alle bestemte kjemikalier (molekyler og atomer) og deres konsentrasjoner ikke kan bestemmes. For raske bakterier brukes få komplekse stoffer, som biffekstrakt, gjærekstrakt og pepton i media, hvis eksakte kjemiske sammensetning (molekyler og atomer) varierer betydelig og er ikke kjent. Disse mediene brukes hovedsakelig til kraftig vekst av bakterier. Eksempler: næringsboks og nærings agar.

III. Spesialisert Media:

Disse mediene brukes til spesifikke formål, i stedet for bare for vekst av bakterier.

Basert på formålet med bruk, er de av følgende typer:

1. Selektive medier:

De er mediene som inneholder en bestemt sammensetning av ingredienser, som støtter veksten av noen målbakterier og hemmer veksten av de andre. De er vant til å isolere bestemte grupper av bakterier.

Når en bestemt gruppe bakterier vokser i et selektivt medium, manifesterer man typiske koloniegenskaper som hjelper til med å detektere og oppregne i forskjellige prøver. Spesielle bakterier av interesse, funnet som isolerte kolonier, er tatt for ytterligere tester for bekreftet identifikasjon. Noen ganger blir selektive medier også brukt som differensialmedier.

Eksemplene på selektive medier er gitt nedenfor:

(a) MacConkey Agar:

Det er vant til å vokse gram-negative arter av bakterier. Krystallvioletten som brukes i mediet hemmer veksten av gram-positive bakterier, samtidig som den gramnegative arten kan vokse.

(b) EMB Agar:

Eosin metylenblått agar (EMB agar) brukes til å vokse gram-negative bakteriearter. Det hemmer delvis veksten av gram-positive bakterier, på grunn av hvilken de gram-negative bakteriearter vokser i det mer voldsomt. Det brukes også til identifisering av den enteriske coliformen Escherichia coli, som vokser på den som blå-svarte kolonier med metallisk grønn glans.

Andre enteriske coliformer, som Enterobacter aerogenes, vokser på det som tykke, mucoide, rosa kolonier. I tillegg til disse laktosefomentene, vokser laktose-nonfomenters også på den, men som fargeløse kolonier, som de tar opp lilla farge av mediet.

(c) Mannitol Salt Agar:

Det brukes til å vokse Staphylococcus spp. Den høye saltkonsentrasjonen (7, 5% NaCl) tilstede i mediet hemmer veksten av de fleste andre bakterier. Det skiller også Staphylococcus i mannitol-fermenterende Staphylococcus, som vokser med gule soner som omgir koloniene og mannitol-ikke-fermenterende Staphylococcus, som vokser uten endring i farging.

2. Differensialmedier:

De er media, hvor forskjellige bakterier vokser som kolonier, med forskjellige visuelle egenskaper.

Eksemplene på differensialmedier er gitt nedenfor:

(a) MacConkey Agar:

På dette medium vokser de ikke-patogene normale tarmbakteriene, som er laktose-fermentorer, som røde kolonier, mens de patogene intestinale bakteriene, som er laktose-ikke-fermentorer, vokser som fargeløse kolonier.

(b) blodagar:

Blod er den viktigste bestanddelen av dette mediet. Det er en anrikningsbestanddel for de begeistente bakteriene som Streptococcus spp.

Det brukes til å differensiere egenskapene til streptokokker for å produsere forskjellige typer hemolyse av blod som følger:

(i) a-hemolyse:

Her forekommer delvis ødeleggelse av RBC, noe som resulterer i grønne fargesoner rundt kolonier på grunn av reduksjon av hemoglobin til metaemoglobin.

(ii) p-hemolyse:

Her skjer fullstendig hemolyse av RBC, noe som resulterer i en klar sone rundt kolonier. Denne hemolysen har to typer hemolysiner, nemlig 'streptolysin O', som er et antigenisk oksygen-labilt enzym og 'streptolysin S', som er et ikke-antigenisk oksygenstabilt lysin.

(iii) y-hemolyse:

Her forekommer ingen hemolyse, noe som resulterer i ingen sone rundt kolonier.

3. Transportmedia:

De er mediene som brukes til kort transport av bakterier, der veksten er uønsket. Slike medier inneholder bare buffer og salt. Mediene inneholder ikke noen kilde til C, N og andre vekstfaktorer. Det forhindrer mikrobiell vekst.

4. Berikningsmedier:

De er media, der den relative andelen av målbakteriene er beriket, da de inneholder næringsstoffene for målbakteriene, mens ingen for de andre. For eksempel inneholder fecal matter svært lavt antall Salmonella og Shigella.

For å isolere dem blir de først kultivert i selenittbuljong eller GN (gram-negativ) buljong, hvor bare salmonella og shigella vil vokse kraftig, mens andre ikke vil vokse og forbli i forsinkelsesfase. Deretter strekkes dette på fast medium for å få kolonier av Salmonella og Shigella.

5. Berikte medier:

De er mediene som brukes til å støtte veksten av maksimale typer bakterier.

6. Biokjemiske medier:

Disse media brukes til å teste biokjemiske aktiviteter av bakterier, noe som bidrar til identifisering. En liste over viktige biokjemiske medier som brukes i de biokjemiske tester som utføres for identifisering av forskjellige bakterier, er gitt nedenfor.