Studie notater om forhåndsflowcytometri

Nedenfor nevnte artikkel inneholder studienotater om forhånds-flowcytometri.

Flowcytometri er den siste teknikken utviklet i løpet av de siste to tiårene for å studere celleinnholdet, spesielt kjernefysisk effektivitet. I tillegg til NPE kunne de fysiske og kjemiske egenskapene til innholdet i de forskjellige cellene og patologiske forhold raskt analyseres med riktig konklusjon.

Flowcytometrene er tilgjengelige i markedet i form av en maskin. Maskinen består av væskesystem, et optisk system for å samle lyssignaler generert som celler som passerer gjennom laseren. Maskinen er også utstyrt med elektronisk system som konverterer lyssignalene til proporsjonale elektroniske signaler som i siste liten digitaliseres for dataanalyse.

Omtrent 5000 celler per sekund, som måles individuelt etter hverandre, kan fjernes fra suspensjonen av heterogen populasjon.

Det sofistikerte designet Fludics-systemet er utstyrt med lasere, optikk, elektronikk og sortering. Fludics-systemet har Fluorescence Activated Cell Sorter (FACS Calibur Fluidsystem), under sortering kan det sortere enkeltcelletall nøyaktighet.

Resultatet er høy renhet med gjenoppretting som faller mellom enkel celle og gjenoppretting. Den har elektronisk styring med tre knapper for å velge PRIME, STAND BY og RUN operasjonsmodus. Frekvensen er kontroller som Høy; (60ul / min.), Medium (35 ul / min) og lavt (12 ul / min).

Excitering og utslipp, fluorokrom, filtre og fargekompensasjon er den viktigste delen av utstyret. 530/30 BP filter måler signaler utgitt av Fluorescence Isothiocyanate (Stain). Hvis Phycoerythrin og Popidium Iodide brukes, brukes 585/42 BP filter. 650 LP filtre brukes hvis Peridinin Chlorophyll og 7-Amino-Actinomycin D Signal genereres.

Lasersignalene leses av Becton Dickinson cellesøk programvare. Florescent detektor og båndfiltre skal justeres etter instruksjon og krav til instrumentet. 488 nm Argon laser lyskilder og 623 nm bandpassfilter er vanligvis til stede i utstyr.

Det har også system for å vise data og analyse. De viktige parameterne er histogrammer, flerparameterdata og listemodusdata og gating. Maskinanalysen av dataene ved hjelp av programvaren og gi histogrammer av DNA-innholdet mot teller som automatisk vises på datamaskinen (49.2).

Anvendelsene til flytcytometer er mange og er en velsignelse for biologisk forskning og for kliniske undersøkelser i mange menneskelige sykdommer. Flowcytometer brukes til å studere blodlinjene i hemopoitisk vev i hodeceller fra luftpustefisk.

Det kan være lett å skille mellom den pluripotente hematopoietiske stamcellen og fenotypen av den modne funksjonelle perifere lymfocyttpopulasjonen. Den betydelige bruken av dette utstyret er å studere apoptosen eller celledød, og også å studere nekrose av cellen på grunn av giftighetstoksisitet.

På grunn av vinkelspredningssignaler er det mulig å løse lymfocytter, monocytter og granulocytter fra lyset helblodsprøve. Det er også mulig å skille blodplater fra bakgrunnsstøyen. Det brukes til immunsystem og i immunfenotyping. Det brukes til å studere leukemi, og lymfom, transplantasjonsforskning, retikulocyttopptelling og analyse av cellulært DNA-innhold.

På grunn av pulsbehandlingsmekanismen er det fordelaktig i DNA-celle-syklusanalyse. NPE-analyse brukes til å skille mellom primær brystkreft og metastase, primær kolonkreft og kolonmetastase samt mage- og ovariecancer (figur 49.2).

Protokollen som brukes er at de første cellene ble fjernet og fikset i 3% paraformaldehyd. De permeabiliseres med 0, 5% Triton x 100. Kjernen DNA ble deretter merket med popidiumjodid etter RNase-behandling ved bruk av syklus Test Plus DNA-sett.