Nyttige notater om enzympapain og enzympepsin

Immunoglobulin er proteiner og er generelt resistente mot fordøyelse av enzymer.

Imidlertid klipper enzymet papain og pepsin immunoglobulinmolekylene. Fragmentene generert av papain og pepsin er nyttige for studier av immunoglobulinstruktur og -funksjoner. Men spaltningsstedene til disse to enzymene er forskjellige (figur 9.5).

Fig. 9.5: Skjematisk diagram over proteolytisk fragmentering av immunoglobulin ved kort behandling med enzymer papain og pepsin.

Enzymapain spalter immunoglobulinet på den N-terminale siden av den inter-tungkjedede disulfidbinding og produserer tre fragmenter (to Fab-fragmenter og ett Fc-fragment). Enzymepepsin spalter immunoglobulinet i den C-terminale regionen og produserer et stort fragment (som inneholder to Fab-regioner) kalt F (ab ') 2 . De gjenværende tunge kjedene på den C-terminale siden fordøyes til flere små peptider

1. Enzym Papain:

Enzymapain klipper hengselområdet på den N-terminale siden av de inter-tungkjedede disulfidene, og dette resulterer i dannelsen av tre fragmenter. (To fragmenter som inneholder den variable region og ett fragment som inneholder CH2- og CH3-regioner). De to fragmentene som inneholder det variable området kalles; Fab-fragmenter (dvs. fragment-antigenbindende) som de har antigenbindingssteder.

Det tredje fragmentet omfatter de karboksylterminale deler av begge tunge kjeder holdt sammen av disulfider. Generelt er strukturen av det tredje fragmentet identisk for mange forskjellige immunoglobulinmolekyler.

Derfor kan fragmenter av disse typer krystalliseres selv om de består av mange forskjellige immunglobulin. Så, dette fragmentet kalles fragmentet krystalliserbart eller Fc fragment. De fleste sekundære biologiske egenskapene til immunglobulin er avhengig av sekvensene i Fc-regionen. Også dette er regionen som er anerkjent av Fc-reseptorene på mange celletyper.

2. Enzym Pepsin:

Enzymepepsin spalter immunoglobulinet på karboksy-terminale siden av hengselområdet, noe som resulterer i et stort fragment kalt F (ab ') 2 . F (ab ') 2 har to Fab-fragmenter forbundet med disulfidbindinger. Fc-regionen blir kraftig nedbrytet av pepsin, og vanligvis forblir intakt intakt Fc-fragment etter pepsin-fordøyelse.